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• 原理
  • 熒光酶標(biāo)儀：基于熒光物質(zhì)被特定波長光激發(fā)后產(chǎn)生熒光的原理，通過檢測熒光強度對樣品進行定性或定量分析。
  • PCR儀：利用DNA在高溫下變性、低溫下引物與模板結(jié)合、適溫下DNA聚合酶催化延伸的特性，通過控制溫度變化實現(xiàn)DNA擴增。
    
• 功能用途
  • 熒光酶標(biāo)儀：主要用于核酸、蛋白質(zhì)等生物分子的定量檢測，如核酸檢測、蛋白質(zhì)濃度測定、酶活性分析、細(xì)胞增殖與毒性檢測等，還可用于研究分子間相互作用、信號通路分析等。
  • PCR儀：專門用于進行聚合酶鏈反應(yīng)，以擴增特定的DNA片段，廣泛應(yīng)用于基因克隆、基因表達(dá)分析、病原體檢測、遺傳疾病診斷、法醫(yī)鑒定等領(lǐng)域。
    
• 檢測對象
  • 熒光酶標(biāo)儀：可檢測標(biāo)記有熒光物質(zhì)的核酸、蛋白質(zhì)、細(xì)胞等樣本，還能用于檢測熒光標(biāo)記的抗體、抗原等，以及一些可通過熒光探針檢測的物質(zhì)。
  • PCR儀：主要針對DNA樣本進行擴增，也可通過逆轉(zhuǎn)錄PCR對RNA進行檢測，但本質(zhì)上還是以DNA為最終檢測對象。
    
• 操作流程
  • 熒光酶標(biāo)儀：一般包括開機預(yù)熱（部分無需預(yù)熱）、設(shè)置檢測參數(shù)（如激發(fā)波長、發(fā)射波長等）、加載樣本、進行檢測、讀取和分析結(jié)果等步驟。操作相對較為簡單，通常不需要復(fù)雜的程序設(shè)置。
  • PCR儀：操作包括實驗前準(zhǔn)備（如配制反應(yīng)體系、設(shè)計引物等）、設(shè)置PCR程序（變性溫度、退火溫度、延伸溫度、循環(huán)次數(shù)等）、將反應(yīng)管放入儀器、啟動PCR反應(yīng)、等待反應(yīng)完成、取出產(chǎn)物進行分析等。操作過程相對復(fù)雜，且對程序設(shè)置的準(zhǔn)確性要求較高。
    
• 儀器結(jié)構(gòu)
  • 熒光酶標(biāo)儀：通常由光源系統(tǒng)（如氙燈、鹵鎢燈等）、濾光系統(tǒng)（激發(fā)光濾光片和發(fā)射光濾光片）、樣品承載裝置（如微孔板）、檢測器（如光電倍增管）、數(shù)據(jù)處理與顯示系統(tǒng)等部分組成。結(jié)構(gòu)相對較為簡單，體積大小因型號而異，有臺式和小型便攜式等多種類型。
  • PCR儀：主要由溫度控制系統(tǒng)（包括加熱塊、溫控傳感器等）、熱蓋（防止蒸發(fā)）、樣品槽（可容納不同規(guī)格的反應(yīng)管或板）、控制系統(tǒng)（用于設(shè)置和調(diào)節(jié)溫度程序）、檢測系統(tǒng)（如熒光檢測模塊，實時監(jiān)測PCR產(chǎn)物）等組成。結(jié)構(gòu)相對復(fù)雜，通常較為笨重，但也有便攜式PCR儀可供選擇。
    
• 檢測靈敏度
  • 熒光酶標(biāo)儀：靈敏度較高，能夠檢測到極低濃度的熒光標(biāo)記物質(zhì)，一般可達(dá)到皮摩爾級別甚至更低，具體的靈敏度取決于儀器的性能和檢測條件。
  • PCR儀：本身不直接具有檢測靈敏度的概念，但它能夠?qū)O微量的DNA片段進行大量擴增，從而使原本難以檢測到的DNA能夠被準(zhǔn)確檢測到。其檢測靈敏度取決于PCR反應(yīng)的效率和擴增倍數(shù)，經(jīng)過適當(dāng)次數(shù)的循環(huán)后，可以檢測到單個拷貝的DNA分子。
    
• 檢測通量
  • 熒光酶標(biāo)儀：常見的熒光酶標(biāo)儀可同時檢測多個樣本，如96孔板或384孔板等，能夠快速獲取大量樣本的檢測結(jié)果，適合高通量篩選和分析。
  • PCR儀：一次也能處理多個樣本，常規(guī)的PCR儀可同時進行幾十個甚至上百個反應(yīng)，一些高通量PCR儀能夠處理更多的樣本，滿足大規(guī)模檢測的需求。