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標(biāo)題: 發(fā)酵罐的滅菌方法 [打印本頁]
作者: 九章機(jī)械 時(shí)間: 2025-7-24 08:38
標(biāo)題: 發(fā)酵罐的滅菌方法
一、濕熱滅菌法（最常用）原理：利用高溫高壓蒸汽的穿透力和熱效應(yīng)，使微生物蛋白質(zhì)變性、酶失活，從而達(dá)到滅菌目的。
適用場(chǎng)景：適用于大多數(shù)發(fā)酵罐（如機(jī)械攪拌通風(fēng)發(fā)酵罐、氣升式發(fā)酵罐）及液體培養(yǎng)基的滅菌。
操作步驟：
- 空罐滅菌（CIP清洗后）
- 關(guān)閉所有閥門，向發(fā)酵罐內(nèi)通入蒸汽，使罐內(nèi)溫度升至 121-130℃，壓力維持在 0.1-0.15 MPa。
- 保持該條件 20-30分鐘，確保罐體、管道、攪拌器等部件徹底滅菌。
- 滅菌后，通過排汽閥緩慢釋放壓力，避免罐內(nèi)負(fù)壓損壞設(shè)備。
- 實(shí)罐滅菌（培養(yǎng)基滅菌）
- 進(jìn)料：將配制好的培養(yǎng)基泵入發(fā)酵罐，注意避免泡沫產(chǎn)生。
- 升溫：開啟蒸汽閥門，使培養(yǎng)基溫度升至 121℃，壓力 0.1 MPa 左右。
- 保溫：維持溫度 121℃ 和壓力 0.1 MPa 持續(xù) 20-30分鐘（具體時(shí)間根據(jù)培養(yǎng)基體積和成分調(diào)整）。
- 降溫：滅菌結(jié)束后，通過夾套通入冷卻水或循環(huán)冷卻液，快速降溫至發(fā)酵所需溫度（如30-37℃）。
- 排汽：降溫過程中需間歇排汽，防止罐內(nèi)形成負(fù)壓，同時(shí)避免蒸汽冷凝水稀釋培養(yǎng)基。
優(yōu)點(diǎn)：滅菌徹底、成本低、操作簡便。
缺點(diǎn)：高溫可能破壞培養(yǎng)基中熱敏性成分（如維生素、氨基酸），需通過補(bǔ)料或優(yōu)化配方解決。
二、干熱滅菌法原理：利用高溫干燥空氣的氧化作用，使微生物脫水、蛋白質(zhì)變性。
適用場(chǎng)景：適用于發(fā)酵罐內(nèi)耐高溫但不宜用濕熱滅菌的部件（如玻璃器皿、金屬工具）。
操作步驟：
- 將待滅菌物品放入干熱滅菌箱，設(shè)置溫度 160-180℃，維持 2-3小時(shí)。
- 滅菌后，待箱內(nèi)溫度降至 60℃ 以下再打開箱門，避免物品驟冷破裂。
優(yōu)點(diǎn)：對(duì)熱敏性物質(zhì)破壞小，適用于干燥物品。
缺點(diǎn)：滅菌時(shí)間長、能耗高，不適用于液體培養(yǎng)基或大型發(fā)酵罐。
三、過濾除菌法原理：通過微孔濾膜（如0.22μm）截留微生物，實(shí)現(xiàn)無菌過濾。
適用場(chǎng)景：適用于熱敏性培養(yǎng)基成分（如血清、酶制劑）或空氣的滅菌。
操作步驟：
- 液體過濾：將培養(yǎng)基通過無菌濾膜（如聚醚砜膜）過濾至已滅菌的發(fā)酵罐中。
- 空氣過濾：在發(fā)酵罐進(jìn)氣口安裝無菌空氣過濾器（如燒結(jié)金屬濾芯），過濾壓縮空氣中的微生物。
優(yōu)點(diǎn)：避免高溫破壞熱敏性成分，適用于特定場(chǎng)景。
缺點(diǎn)：濾膜可能堵塞，需定期更換；無法殺滅濾膜表面的微生物，需配合其他滅菌方法使用。
作者: 路人甲 時(shí)間: 2025-11-20 07:08
同樣遇到過類似的問題，您的解決策略給了我很大的啟示，多謝指導(dǎo)！
作者: 咖啡續(xù)命 時(shí)間: 2025-11-27 16:50
非常感謝您的分享，受益匪淺。
作者: 咖啡續(xù)命 時(shí)間: 7 天前
我很欣賞你的研究方式，幫助我了解得更透徹。
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