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標(biāo)題: ELISA常見問題 [打印本頁]
作者: 別管我了    時間: 昨天 10:42
標(biāo)題: ELISA常見問題
1. 產(chǎn)品有哪幾種規(guī)格？可檢測多少個樣本？
　　產(chǎn)品分為48T和96T兩種規(guī)格。
　　每次實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線一般設(shè)7個不同濃度，加上空白孔，標(biāo)準(zhǔn)曲線一共需要8個孔。因此，一個48T試劑盒zui多可以測定40個樣本（不做重復(fù)且一次用完），一個96T試劑盒zui多可以測定88個樣本（不做重復(fù)且一次用完）?？梢愿鶕?jù)實(shí)際樣本數(shù)量和實(shí)驗(yàn)計劃選擇合適的產(chǎn)品規(guī)格。
　　2.48T和96T的試劑盒有哪些不同？
　　48T和96T的試劑盒，每個孔的反應(yīng)體系都是一樣的。不同的是試劑盒中各組分的規(guī)格，詳見說明書。
　　3. 產(chǎn)品的穩(wěn)定性如何？
　　產(chǎn)品在研發(fā)前期已通過嚴(yán)格的穩(wěn)定測試，發(fā)貨前亦須通過檢測并提供質(zhì)檢報告，在市場上深受廣大客戶的贊許！
　　4.貴公司有沒有酶活性檢測的試劑盒？
　　酶活力的測定實(shí)際上就是測定酶促反應(yīng)的速率。酶活力的大小即酶含量的多少，可以用每克酶制劑或每毫升酶制劑含有多少酶單位來表示，單位是U/g或U/ml。酶活力的測定方法：⑴測定完成一定量反應(yīng)所需的時間，⑵測定單位時間內(nèi)酶催化化學(xué)反應(yīng)量。主要通過產(chǎn)物的增加量或底物的減少量來測定。常用的方法有：⑴分光光度法，⑵熒光法，⑶同位素測定法，⑷電化學(xué)法。
　　ELISA的方法一般是對可溶性抗原或抗體進(jìn)行定性和定量的檢測，所以酶活性是不能用ELISA來檢測的。
　　5.一次ELISA實(shí)驗(yàn)需要多長時間？
　　雙抗體夾心ELISA法一次實(shí)驗(yàn)需要4-4.5小時，競爭ELISA法一次實(shí)驗(yàn)需要2-2.5小時。
　　6.血清樣本如何處理？
　　全血標(biāo)本于室溫放置2小時或4℃過后于1000×g離心20分鐘。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
　　7. 血漿樣本如何處理？
　　應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，于1000×g離心15分鐘，仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
　　8. 尿液樣本如何處理？
　　用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
　　9.細(xì)胞上清液樣本如何處理？
　　檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（1000×g）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心10分鐘左右（5000×g）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
　　10. 組織樣本如何處理？
　　用預(yù)冷的PBS (0.01M,pH=7.4)沖洗組織，以去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果），稱重后將碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣本對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g 離心5~10分鐘，取上清檢測。
　　11.為什么有的試劑盒是采用競爭ELISA法？
　　小分子抗原或半抗原因?yàn)槿狈勺鲓A心法的兩個以上的位點(diǎn)，因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測定，可以采用競爭法。其原理是標(biāo)本中的抗原和固相載體上的抗原競爭化抗體上的結(jié)合位點(diǎn)，標(biāo)本中抗原量含量愈多，結(jié)合在固相上的化抗體愈少，zui后的顯色也愈淺，即顯色深淺與樣本中的抗原濃度成反比。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。
　　12.用什么軟件處理ELISA檢測的數(shù)據(jù)比較好？
　　ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合可以應(yīng)用Curve Expert軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。它使用非常方便，可以生成漂亮的曲線應(yīng)用到論文之中。軟件可以在下載中心進(jìn)行下載。
　　13. 試劑盒做的結(jié)果不理想怎么辦？
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想請及時與客服或，我們可以幫您一起分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如果僅憑實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)無法判斷，您可以將試劑盒發(fā)回給我們進(jìn)行售后檢測。如果是試劑盒本身的質(zhì)量問題，可以為您退換貨；如果是實(shí)驗(yàn)操作的問題，技術(shù)人員可以給您一些改進(jìn)的建議。
　　Anti-IGF-1 R （Insulin-like Growth Factor-I Receptor） 胰島素樣生長因子-I受體抗體 Anti-IGF-1R （Insulin-like Growth Factor-I Receptor）hu、dog、chi、mo、rat 胰島素樣生長因子-I受體抗體 Anti-IGFBP-2 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2) 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-2抗體 Anti-IGFBP-5/IBP5 ( Insulin-like Growth Factor Binding Protein 5) 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-5抗體 Anti-IGF-I（ Insulin-like Growth Factor-I ） 胰島素樣生長因子-I抗體 Anti-IGF-II（ Insulin-like Growth Factor-II ） 胰島素樣生長因子-II抗體 IGF-IIBP3（Insulinlike growth factor 2 mRNA binding protein 3） 胰島素樣生長因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗體 Anti-IKB β (Inhibitor of K B) KB抑制蛋白抗體 Anti-IKB α (Inhibitor of KBα) KB抑制蛋白α抗體 Anti-IKI3 family protein 擬南芥IKI3抗體 Anti-IL-10(Interleukin-10) 白介素10抗體 anti-IL-12(Interleukin-12) 白介素12抗體（白細(xì)胞介素-12） Anti-IL-13(Interleukin-13) 白介素13抗體 anti-IL-16/LCF(interleukin-16)(Lymphocyte Chemotactic Factor) 白細(xì)胞介素-16抗體 Anti-IL-17（Interleukin-17） 白介素-17抗體 Anti-IL-18/IGIF(Interleukin-18) 白細(xì)胞介素-18/干擾素γ誘導(dǎo)因子抗體 Anti-IL1RAPL1 （Interleukin 1 receptor accessory protein-like 1） 白介素受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白抗體 Anti-IL-1α (Interleukin-1α ) 白介素1α抗體 Anti-IL-1β(Interleukin-1β) 白介素1β抗體 Anti-IL-2 (Interleukin-2) 白介素2抗體 Anti-IL-2(Mouse to Humen Interleukin-2) 鼠抗人白細(xì)胞介素-2抗體（單抗） Anti-IL-23(Interleukin-23) 白介素-23抗體 Anti-IL-4(Interleukin-4) 白介素4抗體 Anti-IL-6 (Interleukin-6) Human 白介素6 Anti-IL-6 (Interleukin-6) mouse、rat 白介素6抗體 Anti-IL-6(Interleukin-6/interferon, beta 2)mouse rat 白介素6抗體 Anti-IL-8（Interleukin-8）rat mouse 白介素8抗體 Anti-ILK-1 (Integrin-linked protein kinase 1) 整合素連接激酶-1抗體 anti-ING1/p33(inhibitor of growth gene 1) 生長抑制因子基因1抗體 Anti-Inhibin α 抑制素α抗體 Anti-Insulin 胰島素抗體 Anti-Insulin Receptor-α（ISR-α） 胰島素受體-α抗體 Anti-Insulin(1-51 protein) 胰島素1-51蛋白抗體 Anti-Integrin α3β1 整合素α3β1抗體 Anti-Integrin α4β7/LPAM-1 (Lymphocyte Peyer’s patch Adhesion Molecule 1/Integrin alpha4,beta7) 整合素α4β7抗體 anti-Integrin avb3 整合素avb3抗體 Anti-Integrin αE2/CD103 整合素αE2抗體 Anti-IQGAP1 支架蛋白抗體 Anti-IRS P53 (Insulin receptor suRCtrate P53) 胰島素受體底物p53蛋白抗體 Anti-IRS-1 胰島素受體底物-1抗體 Anti-IRS-2 胰島素受體底物-2抗體 Anti-IRS-3 胰島素受體底物-3抗體 Anti-IRS-4 胰島素受體底物-4抗體 Anti-ISR（Insulin Receptor） 胰島素受體抗體 Anti-ISR-α （Insulin Receptor-α） 胰島素受體-α抗體 Anti-ISR-β （Insulin Receptor-β） 胰島素受體-β抗體 Anti-ITG-α/ CD49d 整合素α4抗體 Anti-ITG-β1/CD29（integrin β1） 粘附分子整合素β1抗體 Anti-ITG-α5/CD49e（Integrin α5） 粘附分子整合素α5抗體 Anti-ITG-β3/CD61(Integrin β chain,β3 precursor) 整合素-β3抗體 Anti-JNK1/3 (c-Jun amino-terminal kinase 1/3) c-Jun氨基末端激酶1/3抗體 Anti-KATPC (ATP-Sensitive K+ Channel Subunits uKATP-1—ATP) ATP敏感性鉀通道蛋白抗體 Anti-Ki-67 Ki-67 Antigen抗體 Anti-Kiss-1 (Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor) 腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因抗體 Anti-Klf4 (Kruppel likefactor 4) 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白抗體 Anti-KLH 血藍(lán)蛋白抗體 Anti-κOR (kappa Opioid receptor) kappa型阿片受體抗體 Anti-K-ras 原癌基因K-ras抗體 Anti-Laminin alpha5 層粘蛋白α5抗體 Anti-L-Citrulline (Rabbit Anti-L-Citrulline) 抗L-瓜氨酸抗體 Anti-LDL-R (Low-density lipoprotein receptor precursor) 低密度脂蛋白受體抗體 Anti-Leptin 瘦素抗體 Anti-Leptin 瘦素抗體 Anti-Leptin receptor 瘦素受體抗體 Anti-Leptin receptor（long） 瘦素受體抗體（長） Anti-Leptin receptor（long） 瘦素受體抗體（長）
作者: 甘薯么    時間: 昨天 16:12
受教了，受益匪淺
作者: 過往云煙    時間: 昨天 18:34
內(nèi)容專業(yè)，很有啟發(fā)



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